益智方拆方不同配比对Aβ25-35诱导大鼠神经元过氧化及凋亡的影响
【出 处】:
【作 者】:
张忠
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王淑艳
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洪庆涛
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司银楚
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白丽敏
【摘 要】
目的比较益智方补虚药组和化浊药组不同比例配伍对B淀粉样蛋白巧埘(A13巧埘)毒性导致细胞过氧化及凋亡的影响,探讨益智方中补虚药和化浊药减轻Aβ毒性的作用机制及其合理配伍比例。方法培养原代大鼠皮层神经元,加入A[3巧碰复制阿尔茨海默病(AD)细胞模型。根据药性把益智方拆分为补虚药组和化浊药组,设立正常对照组、益智方组、补虚药组、化浊药组、补虚化浊2:1配伍组、补虚化浊1:2配伍组,加入各对应含药组大鼠血清,无A13笛埘为空白对照组。24h后比色法测定计算各组细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;免疫组化方法显示天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase3)的表达情况;末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记测定(Tunel)法显示凋亡细胞。结果20μmol/LA15笛埘组细胞存活率降低、LDH漏出率及MDA含量增加、SOD活性降低,Caspase3表达增强,细胞凋亡增多(P〈0.01)。各含药大鼠血清能提高细胞存活率、降低LDH漏出率及MDA含量,增加细胞SOD活性,减轻Caspase3表达,减少凋亡细胞(P〈0.01或P〈0.05)。其中益智方组和补虚药组效果最好(P〈0.01或P〈O.05),补虚化浊2:1配伍组、补虚化浊1:2配伍组不如益智方组和补虚药组(P〈0.01或P〈0.05),化浊药组效果较弱(P〈0.01或P〈0.05)。结论A13笛埘具有神经毒性,导致神经细胞发生过氧化损伤和过度凋亡,益智方补虚药组在抑制细胞过氧化和凋亡方面优于化浊药组,化浊药需配伍补虚药提高疗效,故补虚药在抑制A13笛埘神经毒性方面发挥了主要作用。
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