柱前衍生HPLC-UV同时测定人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸的含量
【出 处】:
【作 者】:
杨欢
邱仁杰
丁月珠
王雄飞
袁瑞娟
北京中医药大学中药学院
北京
100102
【摘 要】目的 建立柱前衍生HPLC-UV同时测定人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸的含量.方法 以2-萘基溴甲基酮为衍生试剂,三乙胺为催化剂,60 ℃水浴条件下对胆酸及猪去氧胆酸进行衍生,考察衍生试剂用量、催化剂用量及反应时间等对衍生产物的影响,确定衍生反应的条件,然后考察建立HPLC-UV分离检测方法对人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸含量进行测定.结果 当衍生试剂的摩尔量与胆酸及猪去氧胆酸的摩尔总量的比大于30∶1,催化剂的摩尔量与两者的摩尔总量的比在5∶1~60∶1范围内,在60 ℃水浴条件下反应50 min时,胆酸及猪去氧胆酸的衍生物反应完全.方法学验证:胆酸在0.4~5.0 μg范围内线性关系良好(r=0.999 5);猪去氧胆酸在0.12~1.5 μg范围内线性关系良好(r=0.999 8).胆酸的平均回收率(n=6)为100%,RSD为2.40%;猪去氧胆酸的平均回收率(n=6)为101%,RSD为1.33%.此批次人工牛黄样品中胆酸的含量为5.55%,猪去氧胆酸的含量为2.55%.结论 本方法灵敏度高、准确可靠、稳定性和重复性好,可用于测定人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸的含量.